二戰期間，希特勒在世界各地召集考古學家尋找“失落的約櫃”——聖經中引導希伯來人與上帝交流的聖物，希特勒欲借其來護佑納粹的戰爭。 為了使希特勒的計劃破滅，印第安納瓊斯博士（Harrison Ford飾）奔赴尼泊爾，一邊奮力挖掘蛛絲馬跡，一邊還要與無孔不入的納粹分子周旋。憑藉著過人的智慧和異於常人的膽量及大無畏的勇氣，瓊斯終於在羅馬找到了指示約櫃位置的太陽手杖，繼而發現了約櫃。 就在大功告成之際，納粹軍卻侵吞了勝利果實，還將瓊斯等人留在了蛇穴裡！但是無往不勝的瓊斯總是有辦法死裡逃生，並狠狠地還以顏色！